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体外受精和早期胚胎培养

2011-2-19 14:40| 发布者: 红娃娃| 查看: 2326| 评论: 1

摘要: 体外受精 (一)试管动物技术的应用实例分析 1、操作对象及应用技术 是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成为早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。 2、应用试管牛的原因 (1)普通 ...

体外受精

(一)试管动物技术的应用实例分析

1、操作对象及应用技术

是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成为早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。

2、应用试管牛的原因

1)普通牛存在的问题

①牛的生育率很低,一生只能生育四五次,但母牛体内卵母细胞却相当多,其卵巢中的卵母细胞数要比一生中正常排出的卵子多1000倍;公牛产生的精子数量更多;

②国外引进良种牛,价格昂贵。

2)解决办法:超数排卵处理,其做法是给供体注射促性腺激素,使一头母牛一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子,用于体外受精和早期胚胎培养。当在体外发育成一个个小胚胎时,再将这些胚胎移植到一个本地牛(如黄牛)体内“借腹怀胎”,实现良种牛的快速大量繁殖。

 

(二)体外受精的过程

哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等几个主要步骤。

1、卵母细胞的采集和培养

第一种方法:对于实验动物如小鼠、兔和家畜如猪、羊等卵母细胞采集时,可先用促性腺激素处理,使其超数排卵,然后在适当的时间从输卵管冲取卵子,并使其直接与获能的精子在体外受精。

第二种方法:从刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢,再从卵巢中采集卵母细胞。

第三种方法:活体采卵。需要借助超声探测仪、内窥镜或腹腔镜等工具,直接从活的动物卵巢中吸取卵母细胞。

后两种方法适用于大型家畜或大型动物。采集的卵母细胞需在体外培养成熟后才能与获能的精子受精。

2、精子的采集和获能

1)收集精子的方法:假阴道法、手握法和电刺激法

名称

含义

适宜动物

假阴道法

是指用特制的假阴道,满足雄性动物交配时对压力、温度和润滑度的要求,同时配备与采精动物相适应的活台畜或假台畜,借助假阴道收集精液

大型家畜或大型动物

手握法

是指徒手或戴上乳胶手套直接把握雄性动物的阴茎,施以适当压力和刺激,即可引起射精

体型较小、易于控制的动物

电刺激法

用特定的电极伸入动物的直肠,直接刺激位于腰荐部的射精中枢神经,引起射精

野生或经济动物

2)精子体外获能的方法

①培养法

对象:啮齿动物、家兔和猪等动物的精子

方法:将取自附睾的精子,放入人工配制的获能液中,培养一段时间后,精子就可获能。

②化学诱导法

对象:牛、羊等家畜的精子

方法:将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,用化学方法诱导精子获能。

3、受精

获能的精子和培养成熟的卵子,一般情况下都可以在获能液或专用受精溶液中完成受精过程。精子和卵子一般要放在培养液小滴内共同培养一段时间才能完成受精。如下图所示

 

   哺乳动物体外受精的过程是:

①采卵 ②收集精子 ③卵母细胞的人工培养 ④精子获能处理 ⑤精子和成熟卵子在受精溶液中总共同培养 ⑥精子用CaCl2处理 ⑦卵母细胞用一定浓度肝素溶液处理 ⑧体外受精 ⑨受精卵培养

哺乳动物体外受精的过程主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集与获能、受精等几个步骤。卵子的采集方法有两种:一种是用促性腺激素超数排卵后从输卵管中冲取,一种是从屠宰后的母体卵巢或活体的卵巢中采集卵母细胞(需要在体外培养成熟后,才能与获能的精子受精)。精子的采集方法主要有三种:假阴道法、手握法和电刺激法。从动物体内采集到的精子必须获能后才能与发育成熟的卵子受精。精子获能的方法主要有两种:培养法和化学诱导法。受精的过程要在获能液或专用的受精溶液中培养一段时间才能完成。

二)胚胎的早期培养

1、培养的目的:精子与卵子在体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养,以检测受精状况和受精卵的发育能力。

2、培养液的成分:哺乳动物胚胎培养液的成分一般比较复杂,除了一些无机盐和有机盐类以外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及动物血清等。

3、移植方式:冷冻保存、移植到受体动物子宫内培养。 

    哺乳动物体外受精的过程是 :

①采卵 ②收集精子 ③卵母细胞的人工培养 ④精子获能处理 ⑤精子和成熟卵子在受精溶液中总共同培养 ⑥精子用CaCl2处理 ⑦卵母细胞用一定浓度肝素溶液处理 ⑧体外受精 ⑨受精卵培养

哺乳动物体外受精的过程主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集与获能、受精等几个步骤。卵子的采集方法有两种:一种是用促性腺激素超数排卵后从输卵管中冲取,一种是从屠宰后的母体卵巢或活体的卵巢中采集卵母细胞(需要在体外培养成熟后,才能与获能的精子受精)。精子的采集方法主要有三种:假阴道法、手握法和电刺激法。从动物体内采集到的精子必须获能后才能与发育成熟的卵子受精。精子获能的方法主要有两种:培养法和化学诱导法。受精的过程要在获能液或专用的受精溶液中培养一段时间才能完成。

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引用 玉林招聘 2013-3-13 13:04
培养一段时间才能完成。

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